分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里，PCR技術(shù)屬于基礎(chǔ)工具，試劑盒質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和可重復(fù)性有著直接關(guān)系。市面上產(chǎn)品種類(lèi)繁多，每個(gè)科研人員都需認(rèn)真對(duì)待如何去選擇適合自己研究的試劑盒，還有如何規(guī)范使用這一問(wèn)題。

如何挑選合適的PCR試劑盒

首先，挑選試劑盒得明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。要是進(jìn)行常規(guī)基因鑒定，普通的Taq酶試劑盒便能滿(mǎn)足需求，且成本更可控。然而，要是涉及高保真擴(kuò)增、長(zhǎng)片段擴(kuò)增或者熒光定量檢測(cè)，那就得針對(duì)性選擇帶有特殊修飾酶或緩沖體系的產(chǎn)品。仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)里的擴(kuò)增性能數(shù)據(jù)，評(píng)估其能不能覆蓋目標(biāo)片段長(zhǎng)度以及GC含量范圍，這比單純比較價(jià)格更為重要。

實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差怎么辦

在碰見(jiàn)重復(fù)性不太好的問(wèn)題之際，提議從試劑盒的分裝以及使用習(xí)慣方面查找原因。大包裝的試劑盒要是反復(fù)進(jìn)行凍融，就會(huì)致使酶活下降以及組分不均勻，這是重復(fù)性差的常見(jiàn)緣由。把試劑盒分裝成單次使用的小份，并且嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)里的反應(yīng)體系配制順序來(lái)做，能夠有效降低批間差異。與此同時(shí)，要保證所使用的耗材和儀器是經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的，防止因設(shè)備差異而引入系統(tǒng)誤差。

試劑盒的儲(chǔ)存與分裝技巧

試劑盒儲(chǔ)存，和其有效期內(nèi)穩(wěn)定性直接相關(guān)聯(lián)。收到試劑盒之后，各組分要馬上按照說(shuō)明書(shū)要求存放至零下二十?dāng)z氏度或者四攝氏度，還要做好標(biāo)記。對(duì)于如酶和dNTP這類(lèi)敏感組分，建議在首次使用之際進(jìn)行無(wú)菌分裝。操作的時(shí)候要在冰盒上完成分裝，使用沒(méi)有核酸酶的離心管以及濾芯吸頭，并且記錄分裝日期與體積，如此既能避免污染，又便于追溯問(wèn)題源頭。

有沒(méi)有在實(shí)驗(yàn)期間碰到過(guò)試劑盒里某一個(gè)組分提前就失效從而致使實(shí)驗(yàn)失敗的那種情形呢？歡迎于評(píng)論區(qū)去分享自身的經(jīng)歷以及排查所積累的經(jīng)驗(yàn)呀。