首次從生物體組織分離后進行培養(yǎng)的那批細胞群體，也就是原代細胞，于生命科學基礎研究以及藥物篩選等領域里占據著不可被替代的位置。跟永生化細胞系不一樣，原代細胞最大程度地留存了來源組織的生理特點與遺傳訊息，進而能更真切地展現(xiàn)出體內的細胞狀況。然而，這同樣表明它們對于環(huán)境變化格外敏感，操作期間的任何一點疏忽都極有可能致使實驗失敗 ， 成為泡影。

為什么原代細胞總是養(yǎng)不活

這差不多是每一個頭一回接觸原代細胞的研究者都將會碰到的難題，原代細胞對生長環(huán)境特別挑，培養(yǎng)基的配方、血清的批次，就連培養(yǎng)皿的表面處理都會明顯影響其貼壁以及增殖能力，更關鍵的是，分離過程里的酶消化時間與力度要是把握不好，會直接損害細胞膜，致使大量細胞在接種之后24小時內死掉，細胞來源個體的年齡、健康狀況以及取樣之后的處理時效性，都是決定細胞活性的關鍵因素。

原代細胞和細胞系到底怎么選

這得看你做實驗的目的是啥。要是研究的目標是去探究藥物在跟真實生理環(huán)境比較接近的情況下細胞的反應，那原代細胞絕對是更好的選擇，為啥呢，因為它們把來源組織的信號通路還有代謝特征給保留下來了。不過細胞系有均一性比較好、增殖能力很強、實驗的可重復性比較高這樣的優(yōu)點。要是你的實驗需要長時間進行觀察或者大規(guī)模地去篩選，那細胞系更合適；而要是涉及個體差異以及組織特異性功能的研究，那就必須得選原代細胞。

實驗前必須確認的三個關鍵

查證細胞來源的合法性以及檢測報告，從而保證不存在細菌、真菌還有支原體污染。其次，預先備好全部培養(yǎng)基以及添加劑，鑒于原代細胞對饑餓以及溫度變化特別敏感，在操作之前需把培養(yǎng)基放進培養(yǎng)箱中預平衡最少1小時。再者，算清楚所需細胞數量，由于原代細胞傳代次數受限，一般僅能傳3至5代，實驗方案得依據這一特性予以優(yōu)化，防止因細胞老化致使實驗中斷。

在著手開展原代細胞實驗之前，你有沒有針對那些有可能出現(xiàn)的難題，做好了充足的應對預案呢？